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產(chǎn)地 | 科研 |
保存條件 | 低溫冷藏 |
品牌 | 帛科 |
貨號 | AE0134 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 宮頸鱗癌;小腸轉(zhuǎn)移;HPV16轉(zhuǎn)化;女性 |
細胞形態(tài) | 貼壁 |
是否是腫瘤細胞 | 否 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 詳見說明書 |
物種來源 | 人 |
包裝規(guī)格 | |
純度 | % |
是否進口 | 是 |
基本特性:
( 1 )組織來源于正常人肺組織。
( 2 )鑒定:肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
( 3 )原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
( 4 )每凍存管細胞數(shù): 500000cells/1ml 。
( 5 )肌動蛋白, alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
( 6 )不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。
公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱: 人腸轉(zhuǎn)移細胞直銷
簡稱:CaSki
種屬:人
來源:宮頸鱗癌;小腸轉(zhuǎn)移;HPV16轉(zhuǎn)化;女性
培養(yǎng)基:1640
狀態(tài):貼壁
產(chǎn)品規(guī)格:
單位:
貨號:AE0134
使用方法:
收到細胞人腸轉(zhuǎn)移細胞直銷后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次;
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中,37℃溫浴3min左右;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后吸棄消化液,再加入完全培養(yǎng)液終止消化;
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,放入37℃,5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4) 待細胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
實驗操作:
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶,置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干(切記保持無菌),4℃冰箱放置,備用。
2、取材:正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥,75%酒精浸泡,無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理:將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS (pH 7.4 )中反復洗滌,去除外部的血漬,洗滌液澄清,用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞:將縱向剪開, 內(nèi)膜面向上,無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍,去掉內(nèi)皮細胞,用1 × PBS (pH 7.4 )洗滌3次。
5、分離中膜:將去掉內(nèi)膜的,繼續(xù)刮動分離中膜,去掉外膜,用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊,加入1 × PBS (pH 7.4 ),轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中,PBS洗滌3次,離心收集沉淀物。
6、消化:在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液,將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化:吸出消化液入新的離心管中,按1:1加入消化終止液,中止酶反應;余下的組織繼續(xù)加入消化液,消化15min ,重復消化3次。
8、收集重懸細胞:收集中止后的消化液于離心管中,1000 rpm,離心10 min,棄去上清,加入培養(yǎng)液重懸,染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度:調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng):放置于37℃,5% CO2培養(yǎng)箱中。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal 7745-40-6 中文名: 分子式:C21H32O3 度:98.0% 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-Aminouracil 932-52-5 中文名:5-氨基尿嘧啶 分子式:C4H5N3O2 度:98.0% 小鼠抗凝血酶受體(A)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-Aminosalicylic acid 89-57-6 中文名:5-氨基水楊酸 分子式:C7H7NO3 度:98.0% 關鍵詞: 小鼠抗凝血酶Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
5-Aminoindole 5192-03-0 中文名:5-氨基吲哚 分子式:C8H8N2 度:98.0% 小鼠抗平滑肌抗體(ASMA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
5-Aminoindazole 19335-11-6 中文名:5-氨基吲唑 分子式:C7H7N3 度:98.0% 小鼠胚胎干細胞系MESPU30(M30)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠干擾素-α 英文名稱: Ierferon α 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: IFN-α Ethyl 3-(3-amino-4-(methylamino)-N-(pyridin-2-yl)benzamido)propanoate 中文名: 分子式:C18H22N4O3
小鼠干擾素-r(mouse IFN-r) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 D-arabinitol 中文名: 分子式:C5H12O5 度:%
小鼠干擾素-b(mouse IFN-b) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Dasatinib 302962-49-8 中文名:達沙替尼 分子式:C22H26ClN7O2S
小鼠干擾素-a(mouse IFN-a) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Dasatinib 302962-49-8 中文名:達沙替尼 分子式:C22H26ClN7O2S 度:98.0% 關鍵詞:
小鼠干擾素 - g (mouse IFN- g ) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 法國 Diaclone Ethyl 2-ethoxy-1-[(2'-cyanobiphenyl-4-yl)methyl]-1H-benzimidazole-7-carboxylate 139481-41-7 中文名: 分子式:C26H23N3O3 度:98.0% 關鍵詞:
組織PKCι激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 (1S,2R)-2-Amino-1,2-diphenylethanol 23364-44-5 中文名:(1S,2R)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇 分子式:C14H15NO 度:98.0% 關鍵詞:
組織PKCθ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 (1S,2S)-1-Amino-2-Indanol 中文名:(1S,2S)-1-氨基-2-茚醇 分子式:C9H11NO 度:98.0%
組織PKCη激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 (2R,3S)-3-Phenylisoserine ethyl ester 143615-00-3 中文名: 分子式:C11H15NO3 度:98.0% 關鍵詞:
組織PKCζ激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 (2Z,6Z,10E,14E,18E)-Farnesylfarnesol 中文名: 分子式:C30H50O 度:96.0%
組織PKCε激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次 (R)-(+)-1,1'-Bi-2-naphthol 18531-94-7 中文名:(R)-(+)-1,1'-聯(lián)-2-萘酚 分子式:C20H14O2 度:98.0%
人腸轉(zhuǎn)移細胞直銷Sarafloxacin 中文名:鹽酸沙拉沙星 分子式:C20H18ClF2N3O3 植物維生素C(VC)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Salvisyrianone 中文名: 分子式:C20H24O3 植物維生素B6(VB6)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
S-2-Benzothiazolyl2-amino-alpha-(methoxyimino)-4-thiazolethiolacetate 中文名:AE活性酯 分子式:C13H10N4O2S3 植物維生素B12(VB12)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rubioncolin C 中文名: 分子式:C27H22O6 植物維生素A(VA)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Rubianthraquinone 中文名: 分子式:C16H12O5 植物維生素D2(VD2)ELISAKit ELISA. 96T/48T